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大鼠脊髓成纖維細胞

簡要描述:大鼠脊髓成纖維細胞脊髓是中樞神經的一部分,位于脊椎骨組成的椎管內,呈長圓柱狀。成纖維細胞是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。脊髓成纖維細胞的主要功能為:構造和維持組織的正常形態(tài),合成和釋放細胞外基質等。

  • 更新時間:2024-07-10
  • 廠商性質:生產廠家
  • 生產地址:上海
  • 訪  問  量:390

詳細介紹

品牌YLKBIO貨號YLK-XB1191h
規(guī)格5*10^5供貨周期現貨
主要用途科研應用領域化工,生物產業(yè)
組織來源脊髓組織

大鼠脊髓成纖維細胞

產品名稱 :大鼠脊髓成纖維細胞

產品貨號 :YLK-XB1191h

組織來源 :脊髓組織

產品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶


細胞簡介:

脊髓成纖維細胞分離自脊髓組織。脊髓是細細的管束狀的神經結構,位于脊柱的椎管內且被脊椎保護。是源自腦的中樞神經系統(tǒng)延伸部分。中樞神經系統(tǒng)的細胞依靠復雜的聯系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經信息。人和脊椎動物中樞神經系統(tǒng)的一部分,在椎管里面,上端連接延髓,兩旁發(fā)出成對的神經,分布到四肢、體壁和內臟。脊髓的內部有一個H 形(蝴蝶型) 灰質區(qū),主要由神經細胞構成。在灰質區(qū)周圍為白質區(qū),主要由有髓神經纖維組成。脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經(稱為脊神經) 分布到全身皮膚、肌肉和內臟器官。脊髓是周圍神經與腦之間的通路,也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經的出入可把脊髓也分為相應的31節(jié),31對脊神經就是由不同的脊椎發(fā)出的。成纖維細胞(Fibroblast) 是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。

成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化。成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的脊髓成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30m in細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起。6h后細胞基本貼壁wan全,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團。細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,  呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀。細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。脊髓成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括:構造和維持組織的正常形態(tài)。合成和釋放細胞外基質。組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。


細胞特性

1) 組織來源于實驗動物的正常脊髓組織。

2) 細胞鑒定:波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色為陽性。

3) 經鑒定細胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

5) 細胞生長方式:梭形,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。


量檢測

優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

培 養(yǎng) 基 :含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態(tài) :成纖維細胞樣
傳代特性 :可傳5代左右。3代以內狀態(tài)最佳
傳代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%

該細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內加入5ml完培終止消化。
3) 經1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
5) 原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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